918博天堂的培养条件如下：气相可使用95%的空气加上5%的二氧化碳，温度设定为37℃，添加10%的FBS及1%的抗生素/青霉素（P/S）。此细胞系来源于DJGriad，通过58岁白人男性肺癌患者的肿瘤组织移植培养建立。A549细胞能够通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。

918博天堂的传代方法建议首次进行1:2传代。换液情况为每两天进行一次。我们推荐您在购买细胞时同时购买培养基，以便享受更优惠的价格。当收到细胞后，应及时将其培养至良好状态，并用完全培养液灌满细胞瓶并封口，以确保运输细胞的最佳效果。

收到细胞后，先用75%的酒精对整个细胞瓶喷洒消毒，然后在超净台内进行无菌操作。之后，将细胞瓶置于37℃、5% CO2培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态，然后继续处理。使用显微镜观察细胞的生长情况，并拍摄不同倍数的照片保存（建议分别拍摄40x、100x、200x的照片），前三天的照片将作为重要的售后依据，不提供照片将默认收到的状态良好。

细胞培养步骤：

a. 细胞传代：当细胞未达到80%汇合度时，将培养瓶中的完全培养液收集至离心管，保留5ml培养基，置于37℃、5% CO2孵箱中培养；如果细胞密度已经超过80%，则可以进行传代。具体步骤如下：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液，放置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞情况，若细胞变圆且脱落，迅速回到操作台，轻敲培养瓶后加入超过5ml的完全培养基以终止消化。
3. 轻轻吸打细胞使其完全脱落后，将悬液转移至15ml离心管，1000 RPM离心5分钟，弃去上清，再加入1-2ml的完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例分瓶，添加新鲜培养基至每瓶5-8ml，最后置于37℃、5% CO2的细胞培养箱中继续培养。

b. 细胞冻存：

1. 当细胞长至覆盖培养瓶80%面积时，弃去培养液，并用PBS清洗细胞一次。
2. 添加约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液，观察细胞回缩后迅速加入5ml的完全培养液终止消化，轻轻吹打使细胞脱落，转移至15ml离心管中，1000 RPM离心5分钟。
3. 弃去上清后，沉淀细胞加入1ml的燕佳生物无血清冻存液（货号：C7001），混匀后移入冻存管中。
4. 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱中，若需转入液氮罐，需在-80℃冰箱中存放24小时以上再转入。

c. 细胞复苏：

1. 从液氮中取出冻存管（佩戴防护面具），立即放入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%酒精擦拭管外壁。
2. 将冻存管中的细胞转移至含有5ml完全培养基的15ml离心管，1000 RPM离心5分钟。
3. 弃去上清，沉淀细胞用5ml完全培养基重悬，接种至T25培养瓶，置于37℃、5% CO2细胞培养箱中培养。
4. 第二天更换为新鲜的完全培养基继续培养。

注意事项：有些细胞在运输过程中可能会脱落，这属于正常现象。如脱离较多，可将培养瓶中的培养液收集至离心管，1000 RPM离心5分钟，通过此方式收集的上清可用于过渡培养。沉淀后可加入胰酶1-2ml，轻轻吹打后重悬，消化1-2分钟后加以5ml完全培养基终止消化，再次离心，弃去上清，并加入1-2ml完全培养基重悬。最后，按照1:2的比例进行分瓶传代，补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，再放入37℃、5% CO2细胞培养箱中培养。通过918博天堂的专业指导，确保您的细胞培养更为顺利。