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NEWS胎牛血清使用中的常见问题 - 918博天堂解析
来源:范枫瑗 日期:2025-07-15918博天堂的血清储存和冷冻方法是确保产品质量的关键。首先,将血清从冷冻箱取出后,应在2~8℃的冰箱中融解,随后在室温下完全融化。在融解过程中,应定期摇晃,以保证成分的均匀性。需要注意的是,长时间在2-8℃保存可能导致蛋白质和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)聚集,形成沉淀或混浊,因此建议在-20℃以下存储血清,避免反复冻融。最佳做法是将血清保存在-20℃,若在4℃保存,建议不要超过一个月。如无法一次用完,可以将血清无菌分装至合适的灭菌容器,再放回冷冻。
关于血清中出现的絮状沉淀,它们主要由纤维蛋白和脂蛋白组成,这种现象是正常的,不会影响其质量。为了去除沉淀,可以将血清离心(400g,1-2分钟),或让其自然沉积在瓶底,然后小心地将清液转移至另一个无菌瓶。不建议使用过滤的方法,因为沉淀容易堵塞滤膜。通常,轻轻摇晃并将血清加热至37℃能使沉淀重新溶解,因此在使用时应将血清摇匀并加热至37℃,沉淀将自然消失。
选择适合的血清对于实验室至关重要。根据国内人士的普遍看法,HYCLONE的血清是高质量的,而我在北美的经验则表明,国外普遍认为GIBCO的产品更为优质。因此,价格并未决定质量。总体来看,这两种品牌的价格普遍较高,但对于一些不太娇气的细胞,国产血清已足够使用。由于HYCLONE和GIBCO在国内没有生产线,我们只能通过代理商购买,而市场上代理商良莠不齐,买到假货的风险较大。因此,我通常从直销商那里购买血清,有些国外生物公司如Wisent已经在国内设立了办事处,虽然知名度不高,但它们的产品质量与HYCLONE相当,且价格更为实惠。
为了避免血清发生沉淀,可以采取以下措施:(1) 在冻结血清时,保持摇晃以确保混合均匀,减少沉淀的形成;(2) 在分装冻存血清时,也要定期摇匀(小心不产生气泡);(3) 不要从-20℃直接转至37℃,因为温度变化过大易导致蛋白质凝聚形成沉淀;(4) 血清不应在37℃停留过久,以免变浑浊,且某些不稳定的成分被破坏,从而影响质量;(5) 热灭活过程应谨慎,以免增加沉淀物;(6) 如需进行热灭活,应遵循56℃,30分钟的原则,并随时摇晃均匀,过高的温度或时间及不均匀的摇晃都会加重沉淀的形成。
小牛血清与胎牛血清存在显著区别:胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)是通过心脏穿刺在屠宰孕牛时获取的新生小牛血清(Calf Serum,CS),则是采自于出生10至14天的小牛。它们的成分和比例各有不同,因此用途及使用方法也有所不同。某些细胞需要胎牛血清以进行生长,而另一些细胞则只需要小牛血清。使用浓度通常在5%-10%之间,特殊要求下可达到20%。技术上,血清应保存在-5℃至-20℃间,若置于4℃不可超过一个月。在冷冻血清之前,需在2-8℃的冰箱中摇匀至完全融化,再在室温下放置,切勿将冷冻的血清直接置于37℃水浴中。放置于37℃前,颜色可能加深,粘稠度增加。加热灭活后,血清应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。如有需求,请随时联系我们!
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